Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Təsvir
Pişik nömrəsi: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix şablon kimi RNT-yə əsaslanan multipleks kəmiyyət PCR dəstidir.Təcrübədə əks transkripsiya və kəmiyyət PCR eyni reaksiya borusunda aparılır, eksperimental əməliyyatı sadələşdirir və çirklənmə riskini azaldır.Bufer və ferment qarışığının unikal dizaynı bir pilləli liyofilləşdirilmiş sistemdə istifadə edilə bilər.Kit kəmiyyət gücləndirilməsi üçün hotstart Taq DNT Polimerase istifadə edərək birinci zəncir cDNA-nın səmərəli sintezi üçün istiliyədavamlı Əks Transkriptazadan istifadə edir.Buraya optimallaşdırılmış reaksiya buferi, fermentlər qarışığı və s. daxildir və qeyri-spesifik PCR gücləndirilməsini effektiv şəkildə maneə törədən və çoxsaylı qPCR reaksiyalarının gücləndirilməsinin effektivliyini artıran amillər əlavə edilib, primerlərin gücləndirmə effektivliyini təmin etməklə yanaşı, çoxsaylı flüoresan kəmiyyət gücləndirilməsinə imkan verir.
Komponentlər
ad |
1. Lyo-Bufer |
2. Lyo-ferment qarışığı |
3. Lyo qoruyucu |
Nəqliyyat vəziyyətiion
A: Lyo-bufer və qoruyucu: -25~-15℃, raf ömrü 1 ildir.
B: Lio-ferment qarışığı, 2-8 ℃, raf ömrü 6 aydır.
Əməliyyat üçün təlimat
1. Reaksiya Sistemi (Nümunə olaraq 25μL götürün)
Komponentlər | Həcm (μL) | Son Konsentrasiya |
Lyo-Bufer | 6 | 1* |
Lyo-ferment qarışığı | 1 | - |
Lyo-Qoruyucu | 8 | - |
Astar Qarışığı (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
Zond Qarışığı (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
RNT Şablonu | 5 | - |
DEPC H2O | 25-ə qədər | - |
2. Optimallaşdırılmış Velosiped Protokolu
1) Standart Velosiped Protokolu
Reaksiya mərhələsi | Temperatur | Vaxt | Velosiped | |
1 | Əks transkripsiya | 50°Ca | 10 dəq | 1 |
2 | İlkin denatürasiya | 95°C | 5 dəq | 1 |
3 | Gücləndirmə reaksiyası | 95°C | 15san | 45 dövrə |
60°Cb | 30sanc |
2) Sürətli Velosiped Protokolu
| Reaksiya mərhələsi | Temperatur | Vaxt | Velosiped |
1 | Əks transkripsiya | 50°Ca | 2dəq | 1 |
2 | İlkin denatürasiya | 95°C | 2san | 1 |
3 | Gücləndirmə reaksiyası | 95°C | 1san |
45 dövrə |
60°Cb | 13sanc |
Qeyd:
a) Ters transkripsiya: Temperatur 10-15 dəqiqə ərzində 42°C və ya 50°C seçə bilər.
b) Gücləndirmə reaksiyası: Temperatur dizayn edilmiş primerlərin Tm qiymətinə uyğun olaraq tənzimlənir.
c)Floresensiya siqnal alınması: Təcrübə prosedurunu tələblərinə uyğun olaraq təyin edinalət təlimatı.
Texniki Məlumat/Spesifikasiyalar
İsti başlanğıc | Quraşdırılmış isti başlanğıc |
Aşkarlama üsulu | Primer-zond aşkarlanması |
PCR üsulu | Bir addım RT-qPCR |
Nümunə növü | RNT |
Qeydlər
1. Bu məhsul yalnız tədqiqat üçün istifadə olunur.
2. Zəhmət olmasa, sağlamlığınızı və təhlükəsizliyinizi təmin etmək üçün lazımi şəxsi qoruyucu vasitələrdən, laboratoriya paltarlarından və əlcəklərdən istifadə edin!