Robustart Taq DNT Polimeraz

Robustart Taq DNT Polimerase isti başlanğıc DNT polimerazıdır.Bu məhsul nəinki daha yaxşı PCR sisteminin hazırlanması və gücləndirilməsi prosesində primerlərin qeyri-spesifik tavlanması və ya primerin yığılması nəticəsində yaranan qeyri-spesifik reaksiyanı maneə törədə bilməz.Buna görə də, əla spesifikliyə malikdir və aşağı konsentrasiyalı şablonların gücləndirilməsi üçün daha effektivdir və multipleksləşdirilmiş PCR gücləndirmə reaksiyası üçün uyğundur.Üstəlik, bu məhsul çox yaxşı tətbiq qabiliyyətinə malikdir və müxtəlif növ PCR reaksiyalarında sabit gücləndirmə nəticələri əldə edilə bilər.

Komponentlər

1.5 U/μL Robustart Taq DNT polimeraza

2.10 × PCR Bufer II (Mg²+ pulsuz) (isteğe bağlı)

3.25 mM MgCl₂(isteğe bağlı)

* 10 × PCR Bufer II (Mg²+ pulsuz) tərkibində dNTP və Mg²+ yoxdur, lütfən, dNTP və MgCl əlavə edin₂reaksiya sistemini hazırlayarkən.

Tövsiyə olunan proqramlar

1.Sürətli gücləndirmə.

2.Çoxlu gücləndirmə.

3.Qanın, tamponların və digər nümunələrin birbaşa gücləndirilməsi.

4.Tənəffüs xəstəliklərinin aşkarlanması.

Saxlama Vəziyyəti

Uzunmüddətli saxlama üçün -20°C, istifadə etməzdən əvvəl yaxşıca qarışdırılmalıdır, tez-tez donma-ərimədən qaçın.

*Soyuducudan sonra yağıntı əmələ gəlirsə, bu normaldır;qarışdırmadan və istifadə etməzdən əvvəl otaq temperaturuna qədər tarazlaşdırmaq tövsiyə olunur.

Vahid Tərifi

Bir aktiv vahid (U) aktivləşdirilmiş qızılbalıq sperma DNT-sini şablon/primer kimi istifadə edərək 30 dəqiqə ərzində 74°C-də 10 nmol deoksiribonukleotidi turşuda həll olunmayan materiala daxil edən fermentin miqdarı kimi müəyyən edilir.

Keyfiyyətə nəzarət

1.SDS-PAGE elektroforetik təmizlik 98%-dən çox.

2.Gücləndirmə həssaslığı, partiyadan partiyaya nəzarət, sabitlik.

3.Ekzogen nukleaz aktivliyi, ekzogen endonükleaz və ya ekzonükleaz çirklənməsi yoxdur

Təlimatlar

Reaksiya Quraşdırma

Qeydlər:

1) a.Buferdə dNTP və Mg²+ yoxdur, lütfən, dNTP və MgCl əlavə edin₂reaksiya sistemini hazırlayarkən.

2) b.qPCR/qRT-PCR üçün istifadə olunarsa, flüoresan zondlar reaksiya sisteminə əlavə edilməlidir.Adətən, 0,2 μM olan son primer konsentrasiyası yaxşı nəticələr verəcəkdir;reaksiya performansı zəif olarsa, primer konsentrasiyası 0,2-1 μM aralığında tənzimlənə bilər.Zond konsentrasiyası adətən 0,1-0,3 μM aralığında optimallaşdırılır.Astar və zondun ən yaxşı birləşməsini tapmaq üçün konsentrasiya qradiyenti təcrübələri aparıla bilər.

Termal velosiped protokolu

Qeydlər

1.Sürətli DNT polimerazanın gücləndirmə sürəti 1 kb/10 s-dən az olmamalıdır.Müxtəlif PCR alətlərinin temperaturun yüksəlməsi və düşmə sürəti, temperaturun idarə edilməsi rejimi və istilik keçirmə səmərəliliyi çox dəyişir, ona görə də xüsusi sürətli PCR aləti üçün optimal reaksiya şəraitini optimallaşdırmaq tövsiyə olunur.

2.Sistem daha yüksək spesifiklik və həssaslıqla yüksək uyğunlaşma qabiliyyətinə malikdir.

3.Yüksək həssaslıqlı PCR aşkarlama reagentləri kimi istifadə üçün uyğundur və multipleks PCR gücləndirmə reaksiyalarında istifadə edilə bilər.

4.5′→3′ polimeraza aktivliyi, 5′→3′ eksonukleaza aktivliyi;3′→5′ eksonükleaz aktivliyi yoxdur;korrektə funksiyası yoxdur.

5.PCR və RT-PCR-nin keyfiyyət və kəmiyyət sınaqları üçün uyğundur.

6.PCR məhsulunun 3′ ucu birbaşa T vektoruna klonlana bilən A-dır.

7.Üç addımlı üsul aşağı tavlama temperaturu olan primerlər üçün və ya 200 bp-dən uzun fraqmentlərin gücləndirilməsi üçün tövsiyə olunur.