Viral DNT/RNT Extraction Kit
Bu dəst nazofarengeal tamponlar, ətraf mühit tamponları, hüceyrə kulturasının supernatantları və toxuma homogenatının supernatantları kimi nümunələrdən yüksək təmizlikli viral DNT/RNT-nin sürətli çıxarılması üçün uyğundur.Dəst yüksək keyfiyyətli viral DNT/RNT çıxarmaq üçün fenol/xloroform üzvi həlledicilərdən və ya vaxt aparan spirt çöküntülərindən istifadə ehtiyacını aradan qaldıran silisium membranının təmizlənməsi texnologiyasına əsaslanır.Əldə edilən nuklein turşuları çirklərdən azaddır və əks transkripsiya, PCR, RT-PCR, real vaxtda PCR, yeni nəsil ardıcıllıq (NGS) və Northern blot kimi aşağı axın təcrübələrində istifadəyə hazırdır.
Saxlama şəraiti
15 ~ 25 ℃ temperaturda saxlayın və otaq temperaturunda nəql edin
Komponentlər
| Komponentlər | 100RXNS |
| Bufer VL | 50 ml |
| Bufer RW | 120 ml |
| RNazsız ddH2 O | 6 ml |
| FastPure RNT Sütunları | 100 |
| Kolleksiya Boruları (2ml) | 100 |
| RNazsız Kolleksiya Boruları (1 .5ml) | 100 |
Bufer VL:Lizis və bağlama üçün bir mühit təmin edin.
Bufer RW:Qalıq zülalları və digər çirkləri çıxarın.
RNazsız ddH2O:Spin sütununda membrandan DNT/RNT-ni çıxarın.
FastPure RNT Sütunları:Xüsusilə DNT/RNT-ni adsorbsiya edir.
Kolleksiya boruları 2 ml:Filtrat toplayın.
RNazsız Kolleksiya Boruları 1,5 ml:DNT/RNT toplayın.
Tətbiqlər
Nazofarengeal tamponlar, ətraf mühitin tamponları, hüceyrə kulturasının supernatantları və toxuma homogenatının supernatantları.
Öz-özünə hazırlanmış Materials
RNase-siz pipet ucları, 1,5 ml RNase-siz sentrifuqa boruları, sentrifuqa, vorteks qarışdırıcı və pipetlər.
Təcrübə Prosesi
Biotəhlükəsizlik kabinetində aşağıdakı addımların hamısını yerinə yetirin.
1. 200 μl nümunəni RNase-siz sentrifuqa borusuna əlavə edin (nümunə qeyri-kafi olduqda PBS və ya 0,9% NaCl ilə hazırlayın), 500 μl Buffer VL əlavə edin, 15 – 30 saniyə ərzində burulğanla yaxşıca qarışdırın və sentrifuqalayın. qarışığı borunun dibində toplamaq üçün qısa müddətə.
2. FastPure RNT Sütunlarını Kolleksiya Borularına 2 ml qoyun.Qarışığı Addım 1-dən FastPure RNT Sütunlarına köçürün, 12,000 rpm (13,400 × g) sürətlə 1 dəqiqə sentrifuqa edin və filtratı atın.
3. FastPure RNT Sütunlarına 600 μl Buffer RW əlavə edin, 12,000 rpm (13,400 × g) sürətlə 30 saniyə sentrifuqa edin və filtratı atın.
4. 3-cü addımı təkrarlayın.
5. Boş sütunu 12,000 rpm (13,400 × g) sürətlə 2 dəqiqə sentrifuqa edin.
6. Diqqətlə FastPure RNT Sütunlarını yeni RNazsız Toplama Borularına 1,5 ml (dəstdə verilir) köçürün və sütuna toxunmadan membranın mərkəzinə 30 – 50 μl RNazsız ddH2O əlavə edin.Otaq temperaturunda 1 dəqiqə dayanmağa icazə verin və 1 dəqiqə 12,000 rpm (13,400 × g) ilə sentrifuqa edin.
7. FastPure RNT Sütunlarını atın.DNT/RNT birbaşa sonrakı analizlər üçün istifadə edilə bilər və ya qısa müddət üçün -30~ -15°C-də və ya daha uzun müddət üçün -85 ~-65°C-də saxlanıla bilər.
Qeydlər
Yalnız tədqiqat istifadəsi üçün.Diaqnostik prosedurlarda istifadə olunmur.
1. Nümunələri əvvəlcədən otaq temperaturuna bərabərləşdirin.
2. Viruslar yüksək yoluxucudur.Təcrübədən əvvəl bütün lazımi təhlükəsizlik tədbirlərinin görüldüyünə əmin olun.
3. Nümunənin təkrar dondurulmasından və əriməsindən çəkinin, çünki bu, ekstraksiya edilmiş viral DNT/RNT-nin deqradasiyasına və ya məhsuldarlığının azalmasına səbəb ola bilər.
4. Öz-özünə hazırlanmış avadanlığa RNase-siz pipet ucları, 1,5 ml RNase-siz sentrifuqa boruları, sentrifuqa, vorteks qarışdırıcı və pipetlər daxildir.
5. Dəstdən istifadə edərkən laboratoriya paltarı, birdəfəlik lateks əlcəklər və birdəfəlik maska taxın və RNase ilə çirklənmə riskini minimuma endirmək üçün RNase-siz istehlak materiallarından istifadə edin.
6. Başqa cür göstərilməyibsə, bütün addımları otaq temperaturunda yerinə yetirin.
Mexanizm və İş axını
