One Step RT-qPCR SYBR Green Premix
Pişik nömrəsi: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix SYBR Green I boyasına əsaslanan flüoresan kəmiyyətin təyini üçündür.Genin spesifik primerlərindən istifadə edərək, əks transkripsiya və qPCR reaksiyaları bir boruda tamamlanaraq, təkrar qapağın açılması və pipetləmə əməliyyatlarına ehtiyacı aradan qaldırır, analizin səmərəliliyini əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdırır və çirklənmə riskini azaldır.RNT nümunələri üçün dəst səmərəli cDNA sintezi üçün istiliyədavamlı Əks Transkriptaza və kəmiyyət gücləndirilməsi üçün HotStart Taq DNT Polimerazdan istifadə edir.Optimallaşdırılmış bufer sistemi altında dəstin həssaslığı yüksək ifadə olunan hədəflər üçün 0,1 pg, orta dərəcədə ifadə olunan hədəflər üçün isə 1 pg qədər yüksək ola bilər.Kit DNT nümunələrinin gücləndirilməsi və miqdarının təyini üçün uyğundur.Bu, müxtəlif bitki və heyvan nümunələrindən, hüceyrələrdən və mikroorqanizmlərdən nuklein turşularının həssas aşkarlanmasına və kəmiyyətinin müəyyən edilməsinə imkan verir.
Komponentlər
| No | ad | Həcmi | Həcmi |
| 1 | Qabaqcıl Bufer | 250 μL | 2×1,25 ml |
| 2 | Qabaqcıl ferment qarışığı | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Pulsuz H2O | 250 μL | 2×1,25 ml |
Saxlama şərtləri
Bu məhsul 1 il ərzində -25~-15 ℃ işıqdan uzaqda saxlanmalıdır.
Təlimatlar
1.Reaksiya sisteminin konfiqurasiyasıd
| Komponentlər | Həcm (μL) | Həcm (μL) | Son konsentrasiya |
| Qabaqcıl Bufer | 12.5 | 25 | 1× |
| Qabaqcıl ferment qarışığı | 1 | 2 | - |
| İrəli Astar (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| Ters astar (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| RNT Tamplateb | X | X | - |
| RNase Pulsuz H2Oc | 25-ə qədər | 50-yə qədər | - |
Qeydlər:
1) a.To, son primer konsentrasiyası 0,2 μmol/L idi, bu da müvafiq olaraq 0,1 və 1 μmol/L arasında tənzimlənə bilər.
2) b.Reagent son dərəcə həssasdır, Ümumi RNT 1pg-1μg diapazonundadır və insan nümunələrinin sınağı müvafiq olaraq 15-30 diapazonunda ümumi Ct dəyərinə nəzarət edərək 1 pg-100 ng optimal giriş göstərdi.
3) c.Hədəf gen gücləndirilməsinin etibarlılığını və təkrar istehsalını təmin etmək üçün 20μL və ya 50μL istifadə etmək tövsiyə olunur.
4) d.Zəhmət olmasa, ultra təmiz dəzgahda hazırlayın və nukleaz qalıqları olmayan ucları və reaksiya borularından istifadə edin;filtr kartricləri olan məsləhətlər tövsiyə olunur.Çarpaz çirklənmədən və aerozolla çirklənmədən çəkinin.
2.Reaksiya proqramı
| Velosiped addımı | Temp. | Vaxt | Velosipedlər |
| Əks transkripsiya | 50℃a | 6 dəq | 1 |
| İlkin denatürasiya | 95℃ | 5 dəq | 1 |
| Gücləndirmə reaksiyası | 95℃ | 15 san | 40 |
| 60℃b | 30 san | ||
| Ərimə əyrisi mərhələsi | Alət Defoltları | 1 | |
Qeydlər:
1) a.Təcrübə ehtiyaclarına uyğun olaraq əks transkripsiya temperaturu 50-55°C arasında seçilə bilər.DNT nümunələri üçün əks transkripsiya prosesi buraxıla bilər.
2) b.Xüsusi hallarda yumşalma/uzatma temperaturu primer Tm dəyərinə uyğun olaraq tənzimlənə bilər, 60°C tövsiyə olunur.
Qeydlər
1. Bu məhsul yalnız tədqiqat üçün istifadə olunur.
2. Təhlükəsizliyiniz üçün laboratoriya paltarları və birdəfəlik əlcəklərlə işləyin.
