DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Pişik №: HC4007B
DNaz I tək və ya cüt zəncirli DNT-ni həzm edə bilən endonükleazdır.5'-fosfat qrupu və 3'-OH qrupu olan mono və oliqodeoksinukleotidlər istehsal etmək üçün fosfodiester bağlarını hidroliz edə bilər.DNase I-in optimal işləmə pH diapazonu 7-8-dir.DNaz I-in aktivliyi Ca-dan asılıdır2+və CO kimi ikivalentli metal ionları ilə aktivləşdirilə bilər2, Mn2+, Zn2+və s. Mg iştirakı ilə2+, DNaz Mən təsadüfi olaraq ikiqat zəncirli DNT-nin istənilən yerini parçalaya bilərəm;Mn-nin hüzurunda olarkən2+, DNase I DNT-ni eyni yerdə qoşa, küt uclar və ya 1-2 nukleotid çıxmış yapışqan uclar əmələ gətirə bilir.Müxtəlif RNT nümunələrinin emalı üçün istifadə edilə bilər.
Komponentlər
| ad | 1KU | 5KU |
| Rekombinant DNaseI (RNazsız) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| DNaz I Reaksiya Buferi (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Saxlama şəraiti
Bu məhsul 2 il müddətində -25~-15°C temperaturda saxlanmalıdır.Zəhmət olmasa təkrar dondurma-ərimədən çəkinin.
Təlimatlar
Yalnız istinad üçün RNT nümunələrindən DNT-nin çıxarılması üçün tətbiq edilir.
1. Aşağıdakı reaksiya sistemini hazırlamaq üçün RNase-siz sentrifuqa boruları və pipet uclarından istifadə edin:
| Komponentlər | Həcm (μL) |
| DNaz I Reaksiya Buferi (10×) | 1 |
| Rekombinant DNasel (RNazsız) | 1 |
| RNT | X |
| RNazsız ddH2O | 10-a qədər |
2. Reaksiya şərtləri aşağıdakı kimidir: 37 ℃, 15-30 dəqiqədən sonra 2,5 mM EDTA məhlulunun son konsentrasiyası əlavə edin və yaxşıca qarışdırın, sonra 10 dəqiqə ərzində 65 ℃.İşlənmiş şablon sonrakı RT-PCR və ya RT-qPCR təcrübələri və s. üçün istifadə edilə bilər.
Qeydlər
1. DNaz l fiziki denaturasiyaya həssasdır;Qarışdırarkən, sınaq borusunu yavaşca tərsinə çevirin vəyaxşı silkələyin, güclü silkələməyin.
2. İstifadə edildikdə ferment buz qutusunda və ya buz vannasında saxlanmalı və istifadədən dərhal sonra -20℃ temperaturda saxlanmalıdır.
3. Bu məhsul yalnız tədqiqat üçün istifadə olunur.
4. Təhlükəsizliyiniz üçün laboratoriya paltarları və birdəfəlik əlcəklərlə işləyin.
