Ultra Nuclease GMP dərəcəli
Pişik №: HC2016A
UltraNuclease GMP dərəcəli gen mühəndisliyi və GMP mühitləri altında hazırlanan Escherichia coli (E.coli) içərisində ifadə edilir və təmizlənir.Elmi tədqiqatlarda hüceyrə supernatantının və hüceyrə lizatının viskozitesini azalda bilər, zülalların təmizlənməsinin effektivliyini artıra və zülalın funksional tədqiqatını gücləndirə bilər.Məhsul həmçinin virusların təmizlənməsi, peyvənd istehsalı və zülal/polisaxarid əczaçılıq istehsalı da daxil olmaqla tətbiqlərin bioloji məhsullarının performansını və təhlükəsizliyini yaxşılaşdıraraq ana nuklein turşusu qalıqlarını pg dərəcəsinə endirə bilər.Bundan əlavə, məhsul hüceyrə terapiyası və peyvəndin inkişafında insan periferik qan mononükleer hüceyrələrinin (PBMC) yığılmasının qarşısını almaq üçün də tətbiq oluna bilər.
UltraNuclease, rəngsiz, şəffaf mayenin görünüşü ilə buferdə (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% qliserin) elüt edilmiş sterilizə edilmiş reagent şəklində verilir.Bu məhsul GMP prosesi tələblərinə uyğun olaraq istehsal olunur və maye formada verilir.
Komponentlər
UltraNuclease GMP dərəcəli (250 U/μL)
Saxlama şərtləri
Məhsul quru buzla göndərilir və iki il ərzində -25℃~-15°C temperaturda saxlanıla bilər.
Məhsul açılıbsa və bir həftədən çox 4℃ temperaturda saxlanılıbsa, süzgəcdən keçirməyi məsləhət görürükmikrob çirklənməsinin qarşısını almaq üçün məhsul.
Spesifikasiyalar
| İfadə Hostu | UltraNuclease geni ilə rekombinant E. coli |
| Molekulyar çəki | 26,5 kDa |
| soelektrik nöqtə | 6.85 |
| Saflıq | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Saxlama Buferi | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% qliserin |
|
Vahid Tərifi | Bir Fəaliyyət vahidinin tərifi (U) istifadə olunan fermentin miqdarıdır2.625 ml-də 30 dəqiqə ərzində ΔA260-ın udma dəyərini 1.0 dəyişdirin8.0 pH ilə 37 ° C-də reaksiya sistemi (tam həzminə bərabərdir)37 μg somon sperma DNT-sini oliqonukleotidlərə). |
Təlimatlar
1. Nümunə Kolleksiya
Yapışqan hüceyrələr: mühiti çıxarın, hüceyrələri PBS ilə yuyun və supernatantı çıxarın.
Süspansiyon hüceyrələri: sentrifuqa ilə hüceyrələri toplayın, hüceyrələri PBS ilə yuyun, 6000-də sentrifuqa edin10 dəqiqə rpm, qranul toplayın.
Escherichia coli: bakteriyaları sentrifuqa edərək toplayın, bir dəfə PBS ilə yuyun, 8000-də sentrifuqa edin5 dəqiqə rpm və qranul toplayın.
2. Nümunə müalicəsi
Toplanmış hüceyrə qranullarını kütlənin(g) həcminin(ml)1:(10-20) nisbətində liziz tamponu ilə və ya buz üzərində və ya otaq temperaturunda mexaniki və ya kimyəvi üsullarla müalicə edin (1 q hüceyrə qranulunda təxminən
109 hüceyrə).
3. Fermentlərlə Müalicə
Reaksiya sisteminə 1-5mM MgCl əlavə edin və pH-ı 8-9-a tənzimləyin.
1 q hüceyrə qranullarını həzm etmək üçün 250 vahid nisbətinə uyğun olaraq UltraNuclease əlavə edin, 37 ℃ temperaturda 30 dəqiqədən çox inkubasiya edin.Lütfən, seçmək üçün “Tövsiyə olunan reaksiya vaxtı” formasına baxınmüalicənin müddəti.
4. Supernatant Kolleksiya
30 dəqiqə 12000 rpm-də sentrifuqa edin və supernatantı toplayın.
Qeyd: Məhlul turşu və ya qələvidirsə və ya yüksək konsentrasiyalarda duz, yuyucu vasitələr və yadenaturantlar üçün fermentin dozasını artırın və ya müalicə müddətini müvafiq olaraq artırın.
Tövsiyə olunan reaksiya şərtlərions
| Parametr | Optimal Vəziyyət | Effektiv Kondisioner |
| Mg²+Konsentrasiya | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT konsentrasiyası | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanol konsentrasiyası | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent Kation Konsentrasiyası | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon konsentrasiyası | 0-10 mM | 0-100 mM |
Tövsiyə Reaksiya Vaxt (37°, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease Miqdarı (Son Konsentrasiya) | Reaksiya vaxtı |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | >4 saat |
| 25 U/ml | 30 dəq |
Qeydlər:
Zəhmət olmasa, sağlamlığınızı və təhlükəsizliyinizi təmin etmək üçün lazımi şəxsi qoruyucu vasitələrdən, laboratoriya paltarlarından və əlcəklərdən istifadə edin!
